1.Wat is celcultuur?
Celcultuur verwijst naar het verwijderen van cellen van dieren of planten en ze vervolgens laten groeien in een gunstige kunstmatige omgeving.De cellen kunnen direct uit het weefsel worden gehaald en vóór het kweken met enzymatische of mechanische middelen worden afgebroken, of ze kunnen worden afgeleid van bestaande cellijnen of cellijnen.
2. Wat is primaire cultuur?
Primaire cultuur verwijst naar het kweekstadium nadat cellen van het weefsel zijn gescheiden en zich onder geschikte omstandigheden hebben vermenigvuldigd totdat ze alle beschikbare substraten bezetten (dat wil zeggen, samenvloeiing bereiken).In dit stadium moeten de cellen worden gesubkweekt door ze over te brengen naar een nieuwe container met vers groeimedium om meer ruimte te bieden voor verdere groei.
2.1 Cellijn
Na de eerste subcultuur wordt de primaire cultuur een cellijn of subkloon genoemd.Cellijnen afgeleid van primaire culturen hebben een beperkte levensduur (dwz ze zijn beperkt; zie hieronder), en terwijl ze passeren, domineren de cellen met de hoogste groeicapaciteit, wat resulteert in een zekere mate van genotype in de populatie die consistent is met het fenotype.
2.2 Celspanning
Als een subpopulatie van een cellijn positief uit de kweek wordt geselecteerd door middel van klonen of een andere methode, zou de cellijn een celstam worden.Celstammen ondergaan meestal aanvullende genetische veranderingen nadat de ouderlijn is begonnen.
3. Beperkte en continue cellijnen
Normale cellen delen zich meestal slechts een beperkt aantal keren voordat ze het vermogen om te prolifereren verliezen.Dit is een genetisch bepaalde gebeurtenis die senescentie wordt genoemd;deze cellijnen worden eindige cellijnen genoemd.Sommige cellijnen worden echter onsterfelijk door een proces dat transformatie wordt genoemd en dat spontaan kan optreden of kan worden geïnduceerd door chemicaliën of virussen.Wanneer een eindige cellijn een transformatie ondergaat en het vermogen krijgt om zich voor onbepaalde tijd te delen, wordt het een continue cellijn.
4. Cultuurconditie
De kweekomstandigheden van elk celtype zijn zeer verschillend, maar de kunstmatige omgeving voor het kweken van cellen bestaat altijd uit een geschikte container, die het volgende bevat:
4.1 Substraat of kweekmedium dat essentiële voedingsstoffen levert (aminozuren, koolhydraten, vitaminen, mineralen)
4.2 Groeifactoren
4.3 Hormonen
4.4 Gassen (O2, CO2)
4.5 Gereguleerde fysische en chemische omgeving (pH, osmotische druk, temperatuur)
De meeste cellen zijn afhankelijk van de verankering en moeten worden gekweekt op een vast of halfvast substraat (hechtende of enkellaagse kweek), terwijl andere cellen drijvend in het medium kunnen groeien (suspensiekweek).
5.Cryopreservatie
Als er overtollige cellen in de subcultuur aanwezig zijn, moeten deze worden behandeld met een geschikt beschermend middel (zoals DMSO of glycerol) en worden bewaard bij een temperatuur onder -130 °C (cryopreservatie) totdat ze nodig zijn.Voor meer informatie over subcultuur en cryopreservatie van cellen.
6.Morfologie van cellen in cultuur
Cellen in kweek kunnen worden onderverdeeld in drie basiscategorieën op basis van hun vorm en uiterlijk (dwz morfologie).
6.1 Fibroblastcellen zijn bipolair of multipolair, hebben een langwerpige vorm en groeien vast aan het substraat.
6.2 Epitheelachtige cellen zijn veelhoekig, hebben een meer regelmatige grootte en zijn in discrete vellen aan de matrix bevestigd.
6.3 Lymfoblastachtige cellen zijn bolvormig en groeien meestal in suspensie zonder zich aan het oppervlak te hechten.
7.Toepassing van celkweek
Celcultuur is een van de belangrijkste hulpmiddelen die worden gebruikt in de cel- en moleculaire biologie.Het biedt een uitstekend modelsysteem voor het bestuderen van de normale fysiologie en biochemie van cellen (zoals metabolisch onderzoek, veroudering), de effecten van medicijnen en toxische verbindingen op cellen, en mutagenese en kankerverwekkende effecten.Het wordt ook gebruikt voor het screenen en ontwikkelen van geneesmiddelen en grootschalige productie van biologische verbindingen (zoals vaccins, therapeutische eiwitten).Het belangrijkste voordeel van het gebruik van celkweek voor al deze toepassingen is de consistentie en reproduceerbaarheid van de resultaten die kunnen worden verkregen met een partij gekloonde cellen.
Posttijd: 03-juni-2019