1.Kiezen van de juiste cellijn
Houd bij het kiezen van de juiste cellijn voor uw experiment rekening met de volgende criteria:
a. Soorten: Niet-menselijke en niet-primaatcellijnen hebben gewoonlijk minder bioveiligheidsbeperkingen, maar uiteindelijk zal uw experiment bepalen of een cultuur van een bepaalde soort moet worden gebruikt.
b.Features: Wat is het doel van je experiment?Cellijnen die zijn afgeleid van lever en nier kunnen bijvoorbeeld geschikter zijn voor toxiciteitstesten.
c.Beperkt of continu: hoewel het kiezen uit een beperkte cellijn u meer opties kan bieden om de juiste functie uit te drukken, zijn continue cellijnen over het algemeen gemakkelijker te klonen en te onderhouden.
d.Normaal of getransformeerd: getransformeerde cellijnen hebben gewoonlijk een hogere groeisnelheid en hogere zaai-efficiëntie, zijn continu en vereisen minder serum in het kweekmedium, maar hun fenotype heeft permanente veranderingen ondergaan door genetische transformatie.
e.Groeiomstandigheden en -kenmerken: Wat zijn uw vereisten voor groeisnelheid, verzadigingsdichtheid, kloneerefficiëntie en suspensiegroeivermogen?Om bijvoorbeeld recombinante eiwitten in hoge opbrengsten tot expressie te brengen, moet u mogelijk cellijnen selecteren die snel groeien en in suspensie kunnen groeien.
f.Overige criteria: Als u een beperkte cellijn gebruikt, is er dan voldoende voorraad beschikbaar?Is de cellijn volledig gekarakteriseerd of moet u deze zelf verifiëren?Als u een abnormale cellijn gebruikt, is er dan een equivalente normale cellijn die als controle kan worden gebruikt?Is de cellijn stabiel?Zo niet, hoe gemakkelijk is het dan om het te klonen en voldoende bevroren voorraad te genereren voor uw experiment?
2.Verkrijg cellijnen
U kunt uw eigen cultuur bouwen op basis van primaire cellen, of u kunt ervoor kiezen gevestigde celculturen te kopen van commerciële of non-profit leveranciers (bijv. celbanken).Gerenommeerde leveranciers leveren cellijnen van hoge kwaliteit die zorgvuldig zijn getest op integriteit en zorgen ervoor dat de kweek vrij is van verontreinigingen.We raden aan om geen culturen te lenen van andere laboratoria, omdat ze een hoog risico op celcultuurbesmetting hebben.Ongeacht de bron, zorg ervoor dat alle nieuwe cellijnen zijn getest op mycoplasmabesmetting voordat u het gaat gebruiken.
Posttijd: 01-02-2023